| Férfi Meddőségi vizsgálatok |
|
| Spermatogram / Spermiogram |
|
|
Az ondóminta elsődleges vizsgálata makroszkópos, mikroszkópos és áramlási citometriás méréseket foglal magában (WHO6, 2021). A makroszkópos vizsgálat során meghatározzák az ejakulátum térfogatát, viszkozitását, pH-értékét és elfolyósodási idejét. A mikroszkópos elemzés a spermiumszámot, sejtes összetételt, mozgást és a peroxidáz-pozitív sejtek arányát vizsgálja. Az életképességet áramlási citometriával mérik. Bár ezek a paraméterek orientáló információt adnak, a WHO6 adatai alapján önmagukban nem prediktívek a férfi termékenységre: normál spermatogram mellett is lehet infertilitás, eltérő paraméterek mellett pedig spontán fogamzás is létrejöhet.
|
|
| minta fajtája: |
ondó |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
Teljes ejakulátum |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
szobahő |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
0,5-1 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
1 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
5 munkanap |
|
|
|
|
|
| DNS fragmentáció Flow cytométerrel |
|
|
A spermiumok örökítőanyagának (DNS) integritását vizsgáló analízis a férfi fertilitás megítélésének egyik kulcsfontosságú, a rutin spermiogramot kiegészítő módszere. A vizsgálat során meghatározásra kerül a spermium-DNS fragmentáció mértéke, amely érzékeny markerét képezi az oxidatív stressznek, a kromatin szerkezeti instabilitásának és az apoptotikus folyamatoknak. A jelenlegi szakirodalmi adatok alapján a megemelkedett DNS-fragmentációs index (DFI) szoros összefüggést mutat a csökkent természetes fogamzóképességgel, az asszisztált reprodukciós eljárások alacsonyabb sikerarányával, valamint a korai embriófejlődési zavarok és vetélések fokozott kockázatával.A Labmagister Kft. a spermium-DNS integritásának vizsgálatára az úgynevezett SCSA (Sperm Chromatin Structure Assay) módszert alkalmazza, amely egy áramlási citometrián alapuló, standardizált és nemzetközileg széles körben validált technika. Az eljárás a savérzékeny, denaturációra hajlamos DNS-szakaszok arányát méri az akridin-narancs festés fluoreszcencia-tulajdonságainak elemzésével, és objektív, reprodukálható módon kvantifikálja a DNS-fragmentáció mértékét (DFI), valamint az éretlen kromatinszerkezet arányát.A vizsgálat különösen indokolt ismeretlen eredetű infertilitás, ismételt asszisztált reprodukciós kudarc, habituális vetélés, valamint határérték közeli spermiogram-paraméterek esetén. Az eredmények klinikailag releváns információt szolgáltatnak az andrológus és az embriológus számára a DNS-integritás javítását célzó terápiás stratégiák megtervezéséhez, illetve az optimális in vitro fertilizációs eljárás (pl. IVF vs. ICSI, illetve spermiumszelekciós technikák) megválasztásához.
|
|
| minta fajtája: |
ondó |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
100 mikroliter |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
szobahő |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
2-3 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
16 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
5 munkanap |
|
|
|
|
| MEGJEGYZÉS: A spermium DNS állományának a fragmentáltsága kihat a termékenyítésre is. Magas DNS fragmentáltsággal rendelkező spermiumok termékenyítő kapacitása csökkent. A magas DNS állomány fragmentáltság növeli a terhesség első trimeszterében bekövetkező abortuszok gyakoriságát. |
|
|
| ROS mérés spermiumokból |
|
|
A spermiumokban és az ondó fehérvérsejtjeiben a teljes szabadgyök (ROS) szint áramlási citometriás módszerrel kerül meghatározásra a Labmagister Kft. vizsgálataiban. Az eljárás lehetővé teszi a ROS-pozitív spermiumok százalékos arányának kvantifikálását is. A szakirodalom szerint a megnövekedett ROS-szint szoros összefüggést mutat a spermium-DNS fragmentációval és a kromatin instabilitásával. A ROS-képződés a fehérvérsejtek egyik evolúciósan konzervált, baktériumokkal szembeni védekező mechanizmusa. Az ondóban felszaporodott fehérvérsejtek fokozott ROS-termelése a spermiumokban lévő DNS károsodásának fő kiváltó tényezője. A mért ROS-szintek klinikailag releváns információt nyújtanak az oxidatív stresszre irányuló terápiás stratégiák és a reprodukciós technikák megválasztásához. Az áramlási citometria lehetővé teszi a sejtspecifikus ROS-aktivitás precíz mérését, amely objektív és reprodukálható adatokat biztosít a klinikai döntésekhez.
|
|
| minta fajtája: |
ondó |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
100 mikroliter |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
4-8 °C / szobahő |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
2-3 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
8 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
5 munkanap |
|
|
|
|
| MEGJEGYZÉS: A spermiumokban és az ondó fehérvérsejtjeiben a teljes szabadgyök (ROS) szint áramlási citometriás módszerrel kerül meghatározásra a Labmagister Kft. vizsgálataiban, beleértve a ROS-pozitív spermiumok százalékos arányát is. A megnövekedett ROS-szint szoros összefüggést mutat a spermium-DNS fragmentációval és a kromatin instabilitásával. A ROS-képződés a fehérvérsejtek evolúciósan konzervált, baktériumokkal szembeni védekező mechanizmusa, és a spermiumok normál működéséhez is szükséges kis mennyiségű ROS jelenléte. Az ondóban felszaporodott fehérvérsejtek fokozott ROS-termelése a DNS károsodás fő kiváltó tényezője. Ugyanakkor a túlzott antioxidáns bevitel, kontrollálatlan táplálék-kiegészítők formájában, a spermaképet tovább ronthatja, ami a reduktív stressz jelensége. Az antioxidánsokat és vitaminokat ezért csak orvosi kontroll mellett, megfelelő dózisban szabad alkalmazni. Az antioxidáns terápia megkezdése előtt ajánlott az ondó oxidációs állapotának vizsgálata, mivel normál ROS-szint mellett alkalmazva a kezelés spermiumszám csökkenéshez vezethet. |
|
|
| DNS fragmentáció + Totál ROS meghatározás flow cytométerrel |
|
|
Lásd fentebb, a két vizsgálat leírásánál.
|
|
| minta fajtája: |
ondó |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
100 mikroliter |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
szobahő |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
2-3 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
8 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
5 munkanap |
|
|
|
|
| MEGJEGYZÉS: Tekintve, hogy a spermiumok DNS állományának fragmentáltságáért nagyrészt a ROS-ek tehetők felelőssé, ezért a két vizsgálat elvégzése együttesen javasolt. |
|
|
| Akroszóma Reakció vizsgálata |
|
|
A spermium feji végén található akroszóma membránjával való összeolvadását vizsgáló akroszóma-reakció (AR) kulcsfontosságú a normál fertilizációhoz. A spermium aktiválódása a petesejt körüli kumulusz-sejtrétegen való áthatolás során kezdődik, ami előfeltétele az AR-indukciónak. A zóna pellucida kontaktusa váltja ki az AR folyamatát, amely lehetővé teszi a spermium bejutását a petesejtbe. Infertilitási problémák esetén gyakran fordul elő a túl korai (spontán) AR vagy az indukált AR elégtelensége. Az AR mértékét mind spontán, mind indukált körülmények között vizsgáljuk, és a folyamatot a Labmagister Kft. áramlási citometriás módszerével, a CD46 membránfehérje specifikus jelölésével detektáljuk. A legújabb kutatások szerint az AR funkcionális vizsgálata prediktív értéket adhat az IVF/ICSI sikerességére és a spermium fertilizáló képességére.
|
|
| minta fajtája: |
ondó |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
teljes ejakulátum |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
szobahő |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
2-3 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
4 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
5 munkanap |
|
|
|
|
| MEGJEGYZÉS: Elégtelen akroszóma-reakció (AR) esetén a spermium idő előtt aktiválódhat, vagy indukció hatására sem váltódik ki, így nem képes a petesejttel fuzionálni. Az asszisztált reprodukciós eljárások előtt ezért javasolt az AR és a HBA vizsgálata. A Labmagister Kft. az AR-t áramlási citometriával, CD46-specifikus jelöléssel méri, biztosítva az objektív és reprodukálható adatokat. A funkcionális tesztek eredménye segíti az optimális módszer (inszemináció, IVF vagy ICSI) kiválasztását. |
|
|
| HBA (Hyaluronan Binding Assay) teszt |
|
|
A petesejtet körülvevő cumulus sejtrétegen való sikeres áthatolás a spermium fertilizáló képességének alapfeltétele. A spermium fején található hialuronan-kötő fehérjék (HBP) biztosítják a spermiumok rögzülését a cumulus réteghez, ami lehetővé teszi az enzimek általi átjárás kialakítását a petesejt felé. A Hyaluronan Binding Assay (HBA) teszt) vizsgálja, hogy a spermiumok hány százaléka képes ehhez a kötődéshez; elvárt érték >80%. Amennyiben a kötődési arány alacsonyabb, a gyermekáldás elmaradása részben ennek lehet a következménye. A HBA teszt segítségével azonban pontosan azonosítható a probléma, így megfelelő asszisztált reprodukciós módszer – például ICSI – alkalmazásával a párnak továbbra is jó esélye van a sikeres teherbeesésre. A HBA teszt objektív, reprodukálható és közvetlenül segíti a klinikai döntéseket a fertilizációs stratégia megtervezésében.
|
|
| minta fajtája: |
ondó |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
teljes ejakulátum |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
szobahő |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
30 perc |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
1 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
5 munkanap |
|
|
|
|
| MEGJEGYZÉS: A spermiumok fent leírt kötödő képességének a méréséhez, úgynevezett HBA (Hyaluronan Binding Assay-HBA) tesztet használnak. A páciens ondó mintájából meghatározott mennyiséget felcseppentenek egy hialuron bevont üveg tárgylemezre és egy bizonyos időn belül megszámolják a hialuronhoz kötödött spermiumok számát. Elvárt, hogy a spermiumok több, mint 80%-a kötődjön a bevont felülethez. Ha a spermiumok ennél kisebb százalékos arányban kötődnek, felmerül annak gyanuja, hogy a gyermekáldás elmaradásáért részben, vagy egészben ez a defektus felelős. Ha a gyanu beigazolódik és egyéb ok ezt nem zárja ki, a párnak még mindig van reménye, hogy gyermekük fog születni. Ehhez viszont a spermiumot direkt kell a petesejtbe injektálni és a korai fejlődési stádiumú embriót (blasztociszta) fogják beülteni a méhbe. Ezt az in vitro fertilizációs eljárást ICSI-nek (Intra Cytoplasmatic Sperm Injection) hívják. |
|
|
| Fruktóz teszt |
|
|
A fruktóz egy olyan cukor, melyet a spermium az energiaellátásának a fedezésére használ fel. A fruktóz főleg a szeminális vezikulumban (ondóhólyag) termelődik és kerül az ondóba. Az ondóban található fruktóz koncentrációja arányos a seminális vezukulum méretével, kiválasztó (szekréciós) és tárolási kapacitásával. Több tudományos közlemény azt is kimutatta, hogy fordított arányosság áll fenn az ondóplazma fruktóz koncentrációja a spermium szám között. A WHO szerint az ondó fruktóz szintje megfelelően jellemzi a szeminális vezikulum működését (WHO laboratory manual for the Examination and processing of human semen FIFTH EDITION.). A WHO útmutatása alapján, a fruktóz szintnek nagyobb, egyenlőnek kell lennie 13 mikromól (umol)/ejakulátum szintnél.
|
|
| minta fajtája: |
ondó |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
teljes ejakulátum |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
szobahő |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
1 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
3 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
15 munkanap |
|
|
|
|
| MEGJEGYZÉS: Nincs |
|
|
| Cink mérés ondóban |
|
|
A cink a szervezet egyik legfontosabb antioxidáns nyomeleme, mely nem képes hosszabb ideig a szervezetben raktározódni, ezért a folyamatosan ürülő mennyiséget rendszeres bevitellel kell pótolnunk. A cink segít a megfelelő tesztoszteron szint, prosztata működés és a férfi húgy-ivari szervek baktérium mentes állapotának a fenntartásában. Ezenkívül alapvető a spermiumok megfelelő funkciójának (kapacitáció és akroszóma reakció) a biztosítása érdekében is. Tehát cink hiányos állapotban mind a hímivarsejtek száma, mind pedig azok funkciója károsodik. Mivel a dohányosoknál, pótlólagos bevitel nélkül, különösen alacsony cink szintet találnak az ondófolyadékban, ezért ezen csoport esetében a cink pótlása kifejezetten fontos. A WHO útmutatása alapján a cink szintnek nagyobb, egyenlőnek kell lennie 2.4 mikromól (umol)/ejakulátum szintnél.
|
|
| minta fajtája: |
ondó |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
teljes ejakulátum |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
szobahő |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
2-3 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
4 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
15 munkanap |
|
|
|
|
| MEGJEGYZÉS: Nincs |
|
|
| Neutrális alfa-glüközidáz mérés ondóban |
|
|
Az neutrális alfa-glükozidáz nevű enzim a mellékherében termelődve kerül a humán ondóba. Mennyisége a mellékhere működés mértékére jellemző paraméter. Csökkent mennyisége az ejakulátumban, a mellékhere vezeték elzáródására utalhat. Az alacsony alfa-glükozidáz szint szintén összefüggésbe hozható bizonyos csökkent férfi termékenységi mutatókkal. A WHO útmutatása alapján a neutrális alfa-glükozidáz szintnek nagyobb, egyenlőnek kell lennie 20 mU/ejakulátum szintnél. Megjegyzés: az alfa-glükozidáz savas formája szintén megtalálható az ondóban, de azt a prosztata választja ki.
|
|
| minta fajtája: |
ondó |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
teljes ejakulátum |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
szobahő |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
2-3 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
4 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
15 munkanap |
|
|
|
|
| MEGJEGYZÉS: Nincs |
|
|
| Spermium 18 órás túlélés |
|
|
A spermiumoknak időre van szükségük, míg a női ivarszervekben eljutnak a hüvelyből a petesejtig, miközben mozgásukkal energiát használnak fel. A túlélési teszt a spermiumok életképességét vizsgálja az ejakuláció után, mind a teljes ejakulátumban, mind preparált mintában. A vizsgálat során a mintákat incubátorban (37 °C, 5% CO₂) tárolják, és az életképes spermiumok arányát 18 órával a mintaleadás után mérik. Ez a teszt érzékeny indikátora a spermium metabolikus rezilienciájának és a fertilizációs képesség fenntarthatóságának, segítve a klinikai döntéshozatalt asszisztált reprodukciós eljárások tervezésében (WHO6, 2021; Agarwal et al., 2020
|
|
| minta fajtája: |
ondó |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
0,5 mL |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
szobahő |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
0,5-1 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
1 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
5 munkanap |
|
|
|
|
|
| Spermium elleni autoantitestek meghatározása (MAR teszt) |
|
|
Az immunológiai infertilitás alapja, hogy a férfi saját immunrendszere a saját hímivarsejtei ellen antitesteket termel, melyek a spermiumok mozgását és életképességét csökkentik. Az auto antitesteket a járulékos ivarmirigyek termelik. Az antitestek, melyek a károsodást okozzák a spermiumok felszínéhez kötödnek.
Az antitestek kimutatásának direkt módszere, hogy az alkalmazott detekciós gyöngyökök azon spermiumokhoz képesek csak kötődni, melyek tartalmazzák a felszínükön az autóantitesteket (mind az IgA, mind az IgG osztályba tartozó antitestekhez is van külön detekciós gyöngy). A gyöngyökkel kapcsolódó spermiumok arányát mikroszkóposan vizsgáljuk az összes spermiumon belül.
|
|
| minta fajtája: |
ondó |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
0,2 mL |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
szobahő |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
1-2 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
2 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
5 munkanap |
|
|
|
|
|
| Az ondó teljes antioxidáns kapacitása (TAC mérés) |
|
|
Az ondó plazmában jelen lévő antioxidáns rendszerek segítenek egyensúlyt tartani a képződött szabadgyökök mennyiségében (ROS). A szabad gyökök kis mennyiségben nélkülözhetetlenek a normál spermium éréshez és fejlődéshez, azonban nagy mennyiségben károsító hatásúak lehetenek.
A terápiásan alkalmazott antioxidáns szerek bejutva a férfi ivarszervében hozzájárulnak az ondó szabadgyök megkötő kapacitásához. A túlzott antioxidánsok alkalmazása nagymértékben lecsökkenti a szabadgyököket, mely a spermiumok érésében nélkülözhetetlenek. Így végső soron csökkenthetik a spermium számot
|
|
| minta fajtája: |
ondó |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
0,2 mL |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
szobahő |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
2-3 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
6 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
5 munkanap |
|
|
|
|
|
| Férfi Gyulladásos vizsgálatok |
|
| Leukosperm vizsgálat flow cytométerrel |
|
|
A spermatogram során nagy számú kerek sejt (nem peroxidáz-pozitív) jelenléte indokolja a Labmagister Kft. áramlási citometriás leukosperm vizsgálatát. A klasszikus peroxidáz-teszt csupán a neutrofil granulocitákat jelzi, míg a Labmagister módszere BD TBNK festékkel a CD45-pozitív sejtek mellett az T-sejteket, B-sejteket, NK-sejteket és monocitákat is detektálja, így átfogó képet ad a gyulladásos sejtek összetételéről. A WHO6 irányelvek ezt a módszert javasolják. Az ondóban jelenlévő gyulladásos sejtek fokozott ROS-termelése a spermiumok DNS fragmentációjának növekedéséhez vezethet, rontva a genetikai integritást és befolyásolva a fertilitást.
|
|
| minta fajtája: |
ondó |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
0,2 mL |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
szobahő |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
3-4 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
4 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
5 munkanap |
|
|
|
|
| MEGJEGYZÉS: A Labmagister Kft. által használt módszer a klasszikus peroxidáz pozitivitási tesztekhez képest sokkal precízebben jellemzi az ondóban levő fehérvérsejteket, kóros esetben a gyulladást. |
|
|
| Ondófolyadékban lévő IL-6 és IL-8 meghatározás |
|
|
A gyulladásos cytokinek vizsgálata minden olyan esetben javasolt, amikor a szaporító szervben (herék, csatornák, prosztata) gyulladásra lehet gyanakodni, de az ondóban gyulladásos sejtek nem mutathatók ki. A vizsgálat az ondó plazma állományában jelen lévő szolúbilis gyulladásos cytokinek, elsősorban IL-6 és IL-8 szintjét méri. Az elasztáz-negatív minták esetén a gyulladás nem zárható ki, mivel az esetek mintegy egyharmadában a minta IL-6-ra, IL-8-ra, vagy mindkettőre pozitív. Magas IL-6 szint esetén a klinikai értékelésnél malignus elváltozásra is gondolni kell. A cytokinszint meghatározása segít a rejtett gyulladás kimutatásában és a célzott terápiás stratégiák kialakításában.
|
|
| minta fajtája: |
ondó |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
0,5 mL |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
szobahő |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
3-4 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
4 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
15 munkanap |
|
|
|
|
|
| Polimorfonukleáris sejtek (PMN) termelte elasztáz meghatározása |
|
|
A PMN granulociták az elasztáz enzimet termelik, amely a kötőszövetben található elasztint fragmentálja. Ezek az elasztin fragmentumok pro-inflammatórikus tulajdonságúak, aktiválják az immunsejteket és fokozzák a gyulladásos mediátorok termelését. A fragmentumok jelenléte így fenntartja, sőt súlyosbíthatja az amúgy is meglévő szöveti gyulladást, létrehozva egy gyulladásos “ördögi kört”. Legújabb kutatások szerint az elasztin fragmentumok nemcsak a helyi szöveti gyulladás fenntartásában játszanak szerepet, hanem oxidatív stresszt indukálhatnak a környező sejtekben, ami a szaporító szervi szövetek funkcióját és a spermium genetikai integritását is befolyásolhatja (Agarwal et al., 2020; WHO6, 2021)
|
|
| minta fajtája: |
ondó |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
0,5 mL |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
szobahő |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
3-4 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
4 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
15 munkanap |
|
|
|
|
| MEGJEGYZÉS: A PMN ELISA teszt nem a szabad elasztáz enzimet méri, hanem a PMNE–alfa1-antitripszin komplexet, amely a neutrofil granulociták aktivitásának megbízható markere. A komplex mennyisége tükrözi a helyi gyulladás mértékét a szaporító szervben, függetlenül a szabad elasztáz rövid felezési idejétől. Ez a módszer lehetővé teszi az aktív gyulladás kimutatását még akkor is, ha a szabad elasztáz koncentrációja alacsony vagy instabil. A PMNE–alfa1-antitripszin komplex mérése így objektív és reprodukálható biomarkerként szolgál a klinikai gyakorlatban. |
|
|
| Női Meddőségi vizsgálatok |
|
| Természetes ölősejtek arányának meghatározása + természetes ölősejtek funkcionális vizsgálata |
|
|
Perifériás vér leukocyta populációjának összetételét és természetes ölősejtjeinek (NK sejtek) aktivitását (funkcionális vizsgálat) határozza meg a mérés. Immunstátusz vizsgálat során vérben flouroklóm jelzett antitestkkel megjelölik a limphocytákat, majd áramlásos cytométeren meghatározzák arányukat. A referenca tartományoktól való eltérések számos betegség okainak/állapotának azonosításra, terápiák nyomon követésére ad felvilágosítást. A vizsgálat során meghatározzák a leukocyta populáción belül T, B, NK sejtek arányát, T sejteken belül a CD4+ ill. CD8+ ill. dupla negatív (CD4-CD8-) ill. CD4+CD8+ (prekurzor) sejteket. Ezen kívül a CD4+ ill CD8+ sejtek arányát (CD4/CD8 ratio) ill. a CD8+CD56+ (NK típusú T sejtek) százalékos mennyiségét. Ezen kívül vizsgálják az aktivált T sejtek mennyiségét is a mintában. Funkcionális vizsgálat során meghatározzák az NK sejtek aktivitását K562-es target sejteken tesztelve. A K562 sejtvonal egy immortalizált mielogén leukémia sejtvonal, mely kifejezetten érzékeny az NK sejtek ölő kapacitására. A vizsgálat során a páciens tisztított limphocytáit együtt inkubáltatják a target sejttel (K562), majd a vizsgálat végén meghatározzák a target sejtek pusztulását.
|
|
| minta fajtája: |
Li-heparin alvadásgátolt perifériás vér |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
8 mL |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
4-8 °C |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
2-3 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
24 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
5 munkanap |
|
|
|
|
| MEGJEGYZÉS: Immunmoduláló (daganat, allergia, egyéb) terápiában és habituális abortusz gyanú fennállása esetén ajánlott elvégeztetni. |
|
|
| Th1/Th2 cytokine irányultság meghatározás (IFNg; IL-4) |
|
|
A vizsgálat során a páciens perifériás véréből tisztított lymphocyta sejteket aktiválják. Az aktiváció következtében a sejtek irányultságuknak megfelelően cytokineket fognak termelni. A termelt cytokinek aránya megmutatja, hogy az adott páciens Th1 vagy Th2 irányultságú. A vizsgálatot alkalmazzák infertilitási problémákkal küzdő hölgyek Th1/Th2 irányultság meghatározására; allergiás páciensek immunterápiájának nyomonkövetésére. A tehességhez a Th2-es irányulság ad kedvező feltételeket.
|
|
| minta fajtája: |
Li-heparin alvadásgátolt perifériás vér |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
8 mL |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
4-8 °C |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
2-3 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
4 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
15 munkanap |
|
|
|
|
| MEGJEGYZÉS: Fontos vizsgálat allergiás betegek immunterápiájának a követésére és habituális abortuszban szenvedők immunállapotának a lemérésére. Továbbá krónikus gyulladásban szenvedők esetében a gyulladás irányultságának meghatározásában lényeges. |
|
|
| Th1/Th2 cytokine irányultság meghatározás intracelluláris citokinek segítségével |
|
|
A vizsgálatot perifériás vérből preparált lymphocitákon végezzük. A sejteket PMA/ ionomycine segítségével aktiváljuk. Az inkubációs idő alatt a sejtek a Th1 illetve, a Th2 irányultságuknak megfelelően különböző cytokineket fognak termelni. Az egyes sejtekben termelődött citokineket fluorokróm kapcsolt, cytokin specifikus festékkel jelezzük és áramlási citométerrel detektáljuk. Matematikai műveletek elvégzése után, a sejteket cytokin termelésük alapján IFNg/IL-4, IFNg/IL-10, IL-2/IL-4, IL-2/IL-10 arányba állítjuk és ezen arányokat adjuk meg a leleten.
|
|
| minta fajtája: |
Li-heparin alvadásgátolt perifériás vér |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
8 mL |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
4-8 °C |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
2-3 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
4 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
5 munkanap |
|
|
|
|
| MEGJEGYZÉS: Fontos vizsgálat allergiás betegek immunterápiájának a követésére és habituális abortuszban szenvedők immunállapotának a lemérésére. Továbbá krónikus gyulladásban szenvedők esetében a gyulladás irányultságának meghatározásában lényeges. |
|
|
| Endometriumból immunstátusz meghatározás (T,B,NKsejtek ill. T sejt alpop.) |
|
|
Endometriumban lévő gyulladásos sejtek összetételét határozzák meg. A mérés során az endometrium szövetéből izolálják a sejteket, majd meghatározzák a főbb leukocyta sejtpopulációkat (T, B, NK sejtek ill., T sejt alpopulációk, aktivált T-sejtek.
|
|
| minta fajtája: |
endometrium |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
szonda űrtartalmától függ |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
4-8 °C |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
2-3 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
6 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
5 munkanap |
|
|
|
|
| MEGJEGYZÉS: Endometrium leukocyta referenciák (normál szövetből):
A uterális NK‑sejtek (uNK) a legnagyobb leukocita populáció a normál humán endometriumban, proliferatív fázisban kb. 30–40 %-ot, a szekretoros fázisban akár 70 %-ot is elérhetnek az összes leukocytán belül, ami fontos az implantáció támogatásában.
A B‑limfociták tipikusan <5 %-ot tesznek ki az endometriális CD45⁺ limfocitákból, és általában nem haladják meg a teljes sejtes populáción belül a ~2 %‑ot normál körülmények között. Az endometriumban a T‑sejtek (CD3⁺) aránya, beleértve a CD4⁺ és CD8⁺ alpopulációkat, változhat a ciklus fázisától és a klinikai kontextustól függően, de általánosan jelentős részét képezik a nyiroksejteknek. Megjegyzés a profilozással kapcsolatban:
A gyulladás vagy reprodukciós rendellenességek esetén a populációk aránya eltérhet a normál referenciáktól (pl. emelkedett uNK vagy B‑sejtszintek egyes altípusokban).Összegzésként: Az endometrium immunprofiljának elemezése során a főbb leukocyta sejtpopulációk — uterális NK‑sejtek (domináns), T‑sejtek (CD4⁺, CD8⁺), B‑sejtek és aktivált T‑sejt alpopulációk — arányát vizsgálják, és ezekhez vannak irodalmi referencia‑tartományok, amelyek segítik a gyulladás vagy immunológiai rendellenesség felismerését. |
|
|
| Egyéb vizsgálatok |
|
| HLA-B 27 meghatározás |
|
|
A HLA-b27 egy sejt felszíni glycoprotein, amely az MHC I komplex molekulának a részét képezi. Fiziológiás körülmények között szerepe van az antigén bemutatásban a CD8+ sejtek felé. Az allél gyakorisága a kaukázusi populációban 8 %. Patológiás körülmények között a HLA-b27 megjelenés a szeronegatív arthritissel van összefüggésben (Spondyloarthritis). Ankylosing spondylitis-es pácensek esetében a pácensek 92%-a HLA-b27 pozitív. Psoriaticus arthritises, reaktív arthritises (Reiter syndróma), enteropathikus arthritiszes pácienseknél a HLA-b27 expressió a páceinsek 60-60%-ában fordul elő. A mérés során BD HLA-B27 kittet használnak áramlási cytometriás analízishez.
|
|
| minta fajtája: |
Li-heparin alvadásgátolt perifériás vér |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
2 mL |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
szobahő |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
6-8 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
48 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
5 munkanap |
|
|
|
|
|
| HIF-1a |
|
|
HIF-1a állandóan expresszálódó fehérje, mely normál oxigén ellátottság mellett gyorsan degradálódik, viszont hipoxiás állapot alatt stabilizálódik. A hypoxiás állapotban stabilizálódott HIF-1a molekula számos gén átíródását segíti elő. A mérés során a perifériás vérből frissen izolált PBMC sejtekben határozzák meg a HIF-1a mennyiséget. A PBMC sejteket feltárják, a benne lévő HIF-1a fehérjét deferoxamin segítségével stabilizálják. A HIF-1a fehérje mennyiségét ELISA módszerrel quantitatív módon határozzák meg.
|
|
| minta fajtája: |
Li-heparin alvadásgátolt perifériás vér |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
4 mL |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
szobahő |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
2-3 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
4 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
15 munkanap |
|
|
|
|
|
| C-vitamin meghatározás |
|
|
A vizsgálat során a mintában lévő aszkorbinsav ill. egyéb antioxidánsok a Fe3+ -t redukálják Fe2+-vé, mely kolorimetriás változást fog előidézni. A mérés specifikussá tételét a párhuzamosan alkalmazott askorbinsav oxidáz biztosítja, mely oxidálja a mintában lévő összes aszkorbinsavat, aminek segítségével meghatározható a tisztán aszkorbinsavhoz kötődő reakció.
|
|
| minta fajtája: |
Li-heparin alvadásgátolt perifériás vér |
|
|
| minimális igényelt mennyiség: |
4 mL |
|
|
| tárolási/szállítási hőmérséklet: |
szobahő |
|
|
| mintalevétel után optimálisan a vizsgálóhelyen: |
1-2 óra |
|
|
| mintalevétel után legkésőbb a vizsgálóhelyen: |
4 óra |
|
|
| leletkiadás legfeljebb: |
5 munkanap |
|
|
|
|
| MEGJEGYZÉS: terápiás célú C vitamin bevitel esetén célszerű követni a plazma szinteket |
|
